鬼峰捕集去除小柱標(biāo)準(zhǔn)化使用規(guī)范
更新時(shí)間:2025-12-04 點(diǎn)擊次數(shù):62
鬼峰捕集去除小柱(簡稱 “捕集柱”)作為色譜分析系統(tǒng)的關(guān)鍵保護(hù)與除雜部件,其規(guī)范使用直接影響色譜圖純度、分析柱壽命及檢測數(shù)據(jù)可靠性。以下從安裝準(zhǔn)備、操作流程、更換判斷、維護(hù)保養(yǎng)及安全注意事項(xiàng)五方面,制定全流程標(biāo)準(zhǔn)化使用規(guī)范,適用于 HPLC、UPLC 等色譜分析場景。 - 兼容性核查:根據(jù)分析方法的流動(dòng)相體系(反相 / 正相 / 離子交換)確認(rèn)捕集柱填料類型(反相選 C18/C8 改性填料,正相選硅膠 / 氰基填料,離子型選離子交換填料),避免填料與流動(dòng)相(如強(qiáng)酸堿、有機(jī)溶劑)不兼容導(dǎo)致降解。
- 規(guī)格匹配:捕集柱內(nèi)徑需與分析柱一致(如 4.6mm 分析柱搭配 4.6mm 捕集柱),長度建議為分析柱的 1/5-1/10(常規(guī) 10-20mm),減少死體積對分離效果的影響;確認(rèn)接口類型(1/16 英寸標(biāo)準(zhǔn) LC 接頭)與系統(tǒng)管路匹配。
- 柱體檢查:新捕集柱開封后,檢查柱體無破損、接頭密封墊完好;若為儲(chǔ)存已久的捕集柱,確認(rèn)保存溶劑與流動(dòng)相互溶(反相柱常用甲醇 / 水 = 80/20,正相柱用正己烷),避免溶劑置換時(shí)產(chǎn)生氣泡。
- 安裝方式:串聯(lián)于進(jìn)樣器與分析柱之間,確保流路方向與捕集柱標(biāo)識(shí)(“IN” 進(jìn)液端、“OUT” 出液端)一致,連接時(shí)手動(dòng)擰緊接頭(力度適中,避免過度用力損壞密封墊或柱體),無漏液現(xiàn)象。
- 平衡活化:新柱或更換流動(dòng)相后,用流動(dòng)相以 0.2-0.5mL/min 流速平衡 30-60 分鐘,直至系統(tǒng)基線平穩(wěn)(噪聲≤0.01mAU),確保填料充分潤濕并達(dá)到吸附平衡,避免初始鬼峰干擾。
- 運(yùn)行參數(shù)協(xié)同:捕集柱與分析柱采用相同流動(dòng)相體系、柱溫及流速,無需額外調(diào)整檢測參數(shù);若分析方法中存在梯度洗脫,平衡時(shí)間需延長至 60 分鐘以上,確保梯度過程中無雜質(zhì)脫附。
- 樣品預(yù)處理配合:樣品需經(jīng) 0.22μm 濾膜過濾,去除顆粒物雜質(zhì),避免堵塞捕集柱;復(fù)雜基質(zhì)樣品(如食品、生物樣品)建議先經(jīng)固相萃取(SPE)預(yù)處理,降低捕集柱吸附負(fù)荷。
- 色譜圖中出現(xiàn)新增鬼峰,且排除流動(dòng)相、分析柱、進(jìn)樣系統(tǒng)污染后,可判定為捕集柱吸附飽和;
- 基線噪聲顯著增大(≥初始值 5 倍)或基線漂移超過 0.1mAU/h,影響目標(biāo)峰定性定量;
- 柱壓升高超過初始值 30%,且排除管路堵塞、分析柱污染等因素;
- 常規(guī)分析場景建議每 50-100 次進(jìn)樣更換 1 支,復(fù)雜基質(zhì)樣品或高靈敏度檢測(檢測限≤0.1μg/mL)每 20-50 次更換,確保吸附效果穩(wěn)定。
- 儲(chǔ)存條件:未使用的捕集柱密封后存放于對應(yīng)保存溶劑中,置于陰涼干燥處(溫度 2-30℃),避免陽光直射和填料干燥;已使用過的捕集柱需用純?nèi)軇_洗 30 分鐘后密封保存(反相柱用甲醇,正相柱用正己烷)。
- 日常清潔:定期檢查連接管路,去除接頭處殘留的流動(dòng)相結(jié)晶或樣品殘留,避免污染擴(kuò)散;若出現(xiàn)輕微柱壓升高,可用純?nèi)軇ㄈ缂状迹┮缘土魉伲?.1mL/min)反向沖洗 10-15 分鐘(僅適用于可反向使用的捕集柱)。
- 系統(tǒng)聯(lián)動(dòng)維護(hù):更換捕集柱時(shí),同步清洗進(jìn)樣器、管路及在線過濾器,避免系統(tǒng)殘留雜質(zhì)快速污染新捕集柱。
- 操作過程中避免接觸流動(dòng)相(如甲醇、乙腈、強(qiáng)酸強(qiáng)堿),佩戴手套和防護(hù)眼鏡,防止化學(xué)灼傷;
- 禁止將捕集柱用于與填料不兼容的體系(如反相捕集柱接觸強(qiáng)堿性流動(dòng)相),避免填料降解產(chǎn)生有害物質(zhì);
- 廢棄捕集柱需按化學(xué)廢物分類處理,不可隨意丟棄,防止環(huán)境污染。